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坂本 由佳; 横谷 明徳
no journal, ,
低線量影響を解明する上で、バイスタンダー効果は重要な要素である。しかしこれまでの研究では、生体内の環境とは大きく異なる培養ディッシュ上の細胞を試料に用いていた。そのため3次元状態に積層した生体中の細胞間とは、情報伝達のメカニズムとなる可能性がある。本研究では、3次元培養細胞中の細胞間におけるバイスタンダー効果の検証を目標とした。用いた細胞はHeLa細胞であり、低付着性のマルチプレートで培養を行うことでス3次元に細胞が凝集するフェロイド状の細胞塊を作製した。このスフェロイドに対して20
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mビームサイズのX線マイクロビームをスフェロイド中の特定部位に照射することに成功した。しかし照射後の継時観察中の微妙な温度変化に伴う培地の対流により、スフェロイドが移動してしまう問題点があることがわり、今後の課題として残された。
坂本 由佳; 嘉成 由紀子; 神長 輝一; 成田 あゆみ; 野口 実穂; 宇佐美 徳子*; 小林 克己*; 藤井 健太郎; 横谷 明徳
no journal, ,
バイスタンダー効果によるスフェロイド中の非照射部を含めた動態を明らかにすることを目的とし、HeLa-Fucci細胞で作製したスフェロイドに対するX線マイクロビーム照射と、その後の経時観察を行うための新しい実験系を構築した。照射サンプルであるスフェロイドは、照射用ディッシュに移し、アガロースゲルを含んだ培地で周囲を満たして、動かないよう固定した。マイクロビーム照射には、KEK-PF、BL-27B(生物ステーション)の装置を利用した。ビームサイズは4040mに設定し、直径150mあるスフェロイドの一部分だけを選択的に狙って照射した。照射後は共焦点レーザー顕微鏡を用いて、細胞周期の変化をライブセル観察した。その結果、マイクロビーム照射部の細胞にのみG2アレストがかかり、細胞周期停止や遅延が起こることが確認された。また、マイクロビームを照射していないスフェロイド、マイクロビームを照射したスフェロイドの非照射部のどちらにも、細胞周期の変化は明確には確認されなかったことから、スフェロイドにおけるバイスタンダー効果は小さいと考えられる。